- 1TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ Đề tài : “Nghiên cứu tạo chủng vắcxin Salmonella choleraesuis nhược độc làm chủng vi khuẩn biến nạp”. - Lý do chọn đề tài Bệnh do vi khuẩn Salmonella và E. - Việc sử dụng kháng sinh tràn lan đã dẫn đến tỷ lệ rất lớn các chủng vi khuẩn kháng lại kháng sinh, do vậy việc điều trị bệnh gặp rất nhiều khó khăn. - Hiện nay trên thị trường có rất nhiều loại vắcxin vi trùng, trong đó hai loại vắcxin vô hoạt và vắcxin nhược độc được sử dụng nhiều nhất. - Vắcxin vô hoạt ít hiệu quả hơn so với các loại vắcxin sống nhược độc. - Những năm gần đây có rất nhiều nghiên cứu và số liệu liên quan đến quy trình sản xuất các loại vắcxin sống nhược độc. - Tuy nhiên các loại vắcxin sống nhược độc tạo ra qua tác dụng lý hóa hoặc bằng phương pháp tiếp truyền truyền thống chỉ giới hạn ở 2một số loại mầm bệnh nhất định và nguy cơ các chủng vi khuẩn vắcxin nhược độc quay trở lại độc lực cao là rất lớn. - Quá trình tạo vắcxin tái tổ hợp bắt đầu bằng việc tạo chủng vi khuẩn nhược độc. - Sử dụng kỹ thuật gen để loại bỏ những gen độc lực của vi khuẩn nhưng vẫn giữ nguyên các đặc tính sinh học, sinh trưởng và phát triển như vi khuẩn ban đầu. - Sau đó tổ hợp gen biểu hiện kháng nguyên ngoại lai cùng với hệ thống khởi động được thiết kế và biến nạp vào chủng vi khuẩn nhược độc, chủng này mang plasmid tái tổ hợp mang kháng nguyên ngoại lai. - Vì vậy trên chủng vắcxin mang đồng thời 2 loại kháng nguyên, kháng nguyên của vi khuẩn và kháng nguyên ngoại lai. - Hiện nay, tại Việt Nam có hai loại vắcxin phòng bệnh phó thương hàn lợn đó là vắcxin vô hoạt và vắcxin nhược độc. - Việc áp dụng những kỹ thuật tiên tiến của Mỹ để nghiên cứu chế tạo vắcxin tái tổ hợp đa giá chất lượng cao, giá thành hạ với một lần tiêm có thể phòng được nhiều bệnh là việc làm cần thiết góp phần hạn chế những thiệt hại do bệnh gây ra. - Từ yêu cầu thực tế và những tìm hiểu về tình hình nghiên cứu chế tạo vắcxin thế hệ mới đang được thực hiện tại nhiều phòng thí nghiệm trên thế giới, việc nghiên cứu tạo chủng vắc xin Salmonella choleraesuis (S. - choleraesuis) nhược độc mang gen crp (cAMP receptor protein), gen asd (aspartic semialdehyde dehydrogenase) đột biến làm chủng vi khuẩn biến nạp mang plasmid ngoại lai của E. - 3Để góp phần đi tới đích chung nêu ra ở trên trong luận văn này tôi thực hiện các nghiên cứu ở công đoạn đầu với nội dung: ”Nghiên cứu tạo chủng vắcxin S. - choleraesuis nhược độc làm chủng vi khuẩn biến nạp”. - Mục đích nghiên cứu của luận văn: tạo được chủng vắcxin S. - choleraesuis nhược độc mang 2 gen crp và asd bị đột biến làm chủng vi khuẩn biến nạp. - Đối tượng nghiên cứu: chủng S. - choleraesuis nhược độc (S. - Nội dung - Tạo dòng plasmid pRE112 mang gen crp đột biến (pRE112/∆crp). - choleraesuis nhược độc gây đột biến gen crp. - Kiểm tra kết quả gây đột biến gen crp. - choleraesuis mang gen crp đã bị đột biến (S. - Tạo dòng plasmid pRE112 mang gen asd đột biến (pRE112/∆asd). - Kiểm tra kết quả gây đột biến gen asd. - choleraesuis mang hai gen crp, asd đột biến. - Phương pháp nghiên cứu ¾ Phương pháp tách chiết ADN tổng số, tách chiết ADN plasmid. - Kết luận Trong nghiên cứu trên, chúng tôi đã đạt được những kết quả sau. - coli χ7213 mang plasmid tái tổ hợp pRE112/∆crp. - choleraesuis 539 mang gen crp đột biến Tạo được chủng E. - coli χ7213 mang plasmid tái tổ hợp pRE112/∆asd. - choleraesuis 179 mang đồng thời 2 gen crp, asd đột biến
Xem thử không khả dụng, vui lòng xem tại trang nguồn hoặc xem
Tóm tắt