Giám sát sự lưu hành của virus cúm mùa tại một số tỉnh miền Bắc Việt Nam, 2012-2013.

- VIRUS CÚM.
- Hình thái và cấu trúc virion virus cúm.
- Cơ chế nhân lên của virus cúm.
- SỰ TIẾN HÓA CỦA VIRUS CÚM.
- Sự tiến hóa của virus cúm A.
- Sự tiến hóa của virus cúm B.
- Phát hiện virus cúm bằng phƣơng pháp RT-PCR.
- Phƣơng pháp phân lập chủng virus cúm.
- GIÁM SÁT SỰ LƢU HÀNH VIRUS CÚM TẠI VIỆT NAM.
- Các chủng virus cúm.
- Phƣơng pháp giám sát virus cúm mùa.
- Qui trình thực hiện xét nghiệm virus cúm.
- KẾT QUẢ PHÂN LẬP VÀ KHUẾCH ĐẠI VIRUS CÚM MÙA TẠI MIỀN BẮC VIỆT NAM .
- ĐẶC TÍNH KHÁNG NGUYÊN CỦA VIRUS CÚM MÙA TẠI MIỀN BẮC VIỆT NAM .
- Đặc điểm di truyền và protein HA virus cúm A/H1N1pdm09.
- Đặc điểm di truyền và protein HA virus cúm A/H3N2.
- Các phân đoạn ARN của virus cúm và chức năng.
- Nguồn gốc virus cúm gây ra các vụ đại dịch cúm thế kỷ XX- đầu thế kỷ XXI.
- Kết quả xác định sự lƣu hành của virus cúm tại miền Bắc Việt Nam bằng phƣơng pháp RT – PCR Bảng 3.2.
- Kết quả xác định các phân týp virus cúm bằng phƣơng pháp RT-PCR.
- Kết quả phân lập virus cúm mùa tại Miền Bắc Việt Nam, 2012-2013.
- Kết quả định týp virus cúm mùa bằng phƣơng pháp HI, 2012-2013.
- So sánh kháng nguyên virus cúm mùa tại miền Bắc Việt Nam với thành phần vắc xin cúm tại Bắc và Nam Bán cầu theo khuyến cáo của CYTTG, 2012-2013.
- Số lƣợng virus cúm A phân tích phân đoạn gen HA.
- Vị trí các axit amin thay đổi trên protein HA virus cúm A/H1N1pdm .
- So sánh độ tƣơng đồng axit amin trên protein HA virus cúm A/H1N1pdm09 giữa các virus nghiên cứu và chủng dự uyển vắc xin, 2012-2013.
- Vị trí các axit amin thay đổi trên protein HA1 của virus cúm A/H3N .
- So sánh độ tƣơng đồng axit amin trên protein HA1 virus cúm A/H3N2 giữa các virus nghiên cứu và chủng dự tuyển vắc xin, 2012-2013.
- Mô hình cấu trúc virion virus cúm.
- Cấu trúc phức hợp RNP của virus cúm.
- Chu trình nhân lên của virus cúm.
- Sự lƣu hành của virus cúm mùa tại miền Bắc Việt Nam, 2012-2013.
- Sự lƣu hành của virus cúm mùa tại miền Bắc Việt Nam, 2009-2013.
- Tỷ lệ lƣu hành các dòng kháng nguyên virus cúm mùa theo năm.
- Sản phẩm phân đoạn gen HA của virus cúm A/H1N1pdm09 sau PCR.
- Cây gia hệ HA virus cúm A/H1N1pdm09 tại miền Bắc Việt Nam, 2012-2013.
- Sản phẩm phân đoạn HA1 của virus cúm A/H3N2 sau PCR.
- Cây gia hệ HA1 virus cúm A/H3N2 tại miền Bắc Việt Nam, 2012-2013.
- Nguyên nhân các vụ dịch/ đại dịch cúm là do có sự thay đổi đặc tính kháng nguyên của virus cúm.
- Giám sát di truyền học và đặc tính kháng nguyên của các virus cúm mùa tại miền Bắc Việt Nam trong giai đoạn 2012-2013.
- Đến tháng 5/1957, căn nguyên dịch đƣợc xác định là virus cúm A/H2N2 phân lập tại Nhật Bản.
- Bắt đầu từ năm 2001, việc giám sát chủ động sự lƣu hành của virus cúm đã đƣợc triển khai tại Hà Nội.
- Kết quả giám sát cho thấy virus cúm lƣu hành đồng thời các chủng 6 cúm mùa khác nhau.
- VIRUS CÚM 1.3.1.
- Virus cúm A đƣợc chia thành các phân týp (subtype) dựa vào cấu trúc kháng nguyên bề mặt là HA (haemagglutinin) và NA (neuraminidase).
- 7 Virus cúm B đƣợc phân chia thành 2 dòng kháng nguyên phân biệt vào những năm 1980, đó là dòng B/Victoria (B/Victoria/2/87-lineage viruses) và dòng B/Yamagata (B/Yamagata/16/88- lineage viruses).
- Vì vậy, virus cúm B đƣợc đặt tên không có sự tham gia của kháng nguyên bề mặt HA và NA (ví dụ: B/Vietnam/IS02010/2012).
- Các virion của virus cúm A và B có vỏ ngoài bao bọc.
- Virus cúm C chỉ có 1 gai glycoprotein.
- Cấu trúc phức hợp RNP của virus cúm * Nguồn: http://cronodon.com/BioTech/Virus_Tech_3.html 9 1.3.3.
- Các phân đoạn ARN của virus cúm và chức năng [47] Phân đoạn ARN Protein Kích thƣớc (bp) Chức năng 1 PB2 2341 Tìm thấy trong quá trình tổng hợp ARN thông tin (mRNA).
- Virus cúm gia cầm gắn vào thụ thể trên tế bào chủ tại ví trí 2,3 (Saα- 2,3Gal), virus cúm ngƣời gắn vào thụ thể trên tế bào chủ tại vị trí 2,6 (Saα- 2,6Gal), trong khi virus cúm lợn gắn đƣợc cả 2 vị trí (Saα- 2,3Gal) và (Saα- 2,6Gal) [28].
- Cơ chế nhân lên của virus cúm Hình 1.3.
- SỰ TIẾN HÓA CỦA VIRUS CÚM 1.4.1.
- Động lực cho sự tiến hóa của virus cúm A chính là những thay đổi trong vật liệu di truyền của nó [20].
- Nguồn gốc virus cúm gây ra các vụ đại dịch cúm thế kỷ XX- đầu thế kỷ XXI [30] Virus cúm Nguồn gốc H1N1 (1918) Có nguồn gốc từ virus cúm gia cầm, do đột biến tại các điểm quan trọng liên quan đến khả năng thích nghi trên vật chủ là ngƣời (gen HA).
- Do đó sự tiến hóa của virus cúm B cũng xảy ra với tần suất thấp hơn [36, 37].
- Phƣơng pháp phân lập chủng virus cúm Phân lập virus đƣợc coi là “tiêu chuẩn vàng” trong giám sát cúm [15].
- Phƣơng pháp định týp virus Virus cúm sau khi phân lập đƣợc định týp (xác định đặc tính kháng nguyên) bằng phản ứng ức chế ngƣng kết hồng cầu (Hemagglutination Inhibition test-HI).
- Các chủng virus cúm 2.2.2.1.
- Tách chiết vật liệu di truyền của virus cúm ARN Sử dụng bộ sinh phẩm tách chiết ARN: QIAamp viral RNA Mini kit, 250 preps, Cat.No.
- 52904, Qiagen để tách chiết ARN của virus cúm từ mẫu bệnh phẩm thu thập.
- Kết quả xác định sự lưu hành của virus cúm tại miền Bắc Việt Nam bằng phương pháp RT – PCR Năm Dƣơng tính Âm tính Tổng số Số mẫu Tỷ lệ.
- Tỷ lệ dƣơng tính này cao hơn so với sự lƣu hành của các virus cúm trong những năm trƣớc đây.
- Trong giai đoạn căn nguyên virus cúm gây hội chứng cúm có tỷ lệ hay năm 2010-2011 là 17,7% (Theo số liệu Trung tâm Cúm quốc gia).
- Kết quả xác định các phân týp virus cúm bằng phương pháp RT-PCR Năm 2012 2013 Tổng số Số mẫu Tỷ lệ.
- tiếp đến là virus cúm A/H3N chiếm 38,6.
- Và cuối cùng là virus cúm A/H1N1pdm chiếm 12,9.
- Sự lưu hành của virus cúm mùa tại miền Bắc Việt Nam Kết quả nghiên cứu cho thấy trong hai năm 2012 và 2013 tại miền Bắc Việt Nam có sự lƣu hành cả 3 phân týp cúm mùa A/H1N1pdm09, A/H3N2 và B.
- Trong đó virus cúm B đƣợc quan sát thấy là lƣu hành trong cả hai năm (chiếm tỷ lệ 47,6.
- Bên cạnh đó hai loại virus cúm mùa khác là A/H1N1pdm09 (chiếm tỷ lệ 12,9%) và A/H3N2 (chiếm tỷ lệ 38,6%) lƣu hành xen kẽ nhau trong 2 năm.
- Trong năm 2012 virus cúm mùa A/H3N2 chiếm ƣu thế đạt đỉnh vào tháng 6/2012.
- 44 Tỷ lệ % bệnh nhân hội chứng cúm dƣơng tính với virus cúm mùa, Việt Nam N=41,773 Hình 3.2.
- Virus cúm A/H3N2 xuất hiện năm và cuối 2013.
- Kết quả phân lập virus cúm mùa tại Miền Bắc Việt Nam Năm Số mẫu phân lập Số mẫu dƣơng tính Tỷ lệ.
- Các virus cúm mùa phân lập từ các bệnh nhân hội chứng cúm (ILI) từ năm 2012-2013 tại miền Bắc Việt Nam có hiệu giá HA ≥ 8 sẽ đƣợc xác định đặc tính kháng nguyên bằng phản ứng ngăn ngƣng kết hồng cầu (HI) sử dụng kháng huyết thanh chuẩn do TCYTTG cung cấp hàng năm.
- Nghiên cứu của chúng tôi trong 2 năm 2012-2013 cho thấy 2 dòng kháng nguyên A/H1N1pdm09 và A/H3N2 vẫn tuân theo quy luật lƣu hành của virus cúm A là xuất hiện xen kẽ nhau giữa 2 năm.
- Với virus cúm B, năm 2012 tỷ lệ cúm B dòng B/Yamagata (33,3%) cao hơn dòng B/Victoria (24,2%) và tỷ lệ này thay đổi năm 2013 với dòng B/Victoria (33,0%) cao hơn dòng B/Yamagata giảm (18,3.
- Vì vậy, kết quả có thể chƣa mang tính đại diện đƣợc cho toàn bộ các virus cúm B lƣu hành tại miền Bắc Việt Nam trong giai đoạn này.
- Kháng nguyên virus cúm B lƣu hành trên thế giới từ trƣớc năm 1983 đến nay đƣợc chia thành 2 dòng: dòng Yamagata (B/Yamagata/16/88- lineage virus) và dòng Victoria (B/Victoria/2/87- lineage virus) [44].
- Đến năm 2013, virus cúm B lƣu hành tại miền Bắc Việt Nam chỉ có dòng B/Yamagata (B/ Wisconsin/1/2010-like virus) tƣơng đồng với thành phần vắc xin tại Nam Bán cầu.
- Vì vậy, những năm virus cúm B lƣu hành đồng thời cả 2 dòng kháng nguyên thì hiệu quả của vắc xin dự phòng là hạn chế.
- Vì vậy, việc giám sát và xác định đặc tính kháng nguyên của virus cúm mùa lƣu hành tại Việt Nam nói chung và miền Bắc nói riêng có ý nghĩa lớn trong việc sử dụng và phát triển vắc xin cúm tại Việt Nam trong tƣơng lai.
- Đặc điểm di truyền và protein HA virus cúm A/H1N1pdm09 3.4.1.1.
- Cây gia hệ HA virus cúm A/H1N1pdm09 Hình 3.5.
- Kết quả phân tích protein HA của virus cúm A/H1N1pdm09 trong nghiên cứu của chúng tôi cho thấy sự thay đổi axit amin liên quan đến sự hình thành các nhóm (hình 3.5.
- Đặc điểm di truyền và protein HA virus cúm A/H3N2 3.4.2.1.
- Kết quả khuếch đại HA1 virus cúm A/H3N2 Hình 3.6.
- Hình ảnh cây gia hệ HA1 của virus cúm A/H3N2 lƣu hành tại miền Bắc Việt Nam đã cho thấy có sự tiến hóa về vật liệu di truyền của phân týp này.
- Tính đa dạng di truyền của virus cúm A/H3N2 cũng đã đƣợc ghi nhận trong những nghiên cứu của chúng tôi trƣớc đây.
- Sự thay đổi của gen HA đóng vai trò quan trọng trong sự tiến hóa của virus cúm.
- Protein HA của virus cúm A/H3N2 Bảng 3.9.
- Kết quả phân tích protein HA1 của virus cúm A/H3N2 trong nghiên cứu của chúng tôi cho thấy sự thay đổi axit amin liên quan đến sự hình thành các nhóm (hình 3.7.
- Virus cúm mùa lƣu hành quanh năm, thƣờng tập trung vào 2 thời điểm là cuối mùa xuân (tháng 2-3) và giữa mùa hè (tháng 7-8).
- Trong đó, virus cúm A/H3N2 và B (năm 2012).
- virus cúm A/H1N1pdm09 và B (năm 2013) là căn nguyên chủ yếu gây dịch.
- Đặc tính kháng nguyên của virus cúm mùa tại miền Bắc Việt Nam tƣơng đồng với các chủng virus sử dụng cho sản xuất vắc xin cúm tại Bắc và Nam Bán cầu trong giai đoạn 2011-2014 theo khuyến cáo của TCYTTG.
- Sự biến đổi về vật liệu di truyền ở virus cúm A/H3N2 dƣờng nhƣ xảy ra thƣờng xuyên hơn virus cúm A/H1N1pdm09.
- Kết quả điện di sản phẩm sàng lọc virus cúm A 2.
- Kết quả điện di sản phẩm sàng lọc virus cúm B 3

Xem thử không khả dụng, vui lòng xem tại trang nguồn
hoặc xem Tóm tắt