- KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG THỰC VẬT I.XÁC ĐỊNH CÁC THÀNH PHẦN CÓ HOẠT TÍNH SINH HỌC TRONG NGUYÊNLIỆU BẰNG PHƯƠNG PHÁP HÓA SƠ BỘ THỰC VẬT : 1.Cách pha một số thuốc thử. - Thuốc thử Bouchardat I 2 2.5 gKI5 g Nước cất 10 g ∗ Thuốc thử Dragendorff:Dung dịch A : Bi(NO 3 ) 2 85 gCH 3 COOH 10 ml Nước cất 40 ml Dung dịch B KI 8 g Nước cất 20 mlTrộn 2 dung dịch A và B khi sử dụng lấy 20ml hỗn hợp A và B, thêm vào CH 3 COOH(20ml) và nước cất (100ml. - Thuốc thử Mayer HgCl2 6.8 gKI 2.5 g Nước cất500 ml ∗ Thuốc thử Liberman-Burchard Anhydric acetic 6.8gH 2 SO 4 đđ 1ml ∗ Thuốc thử FehlingFehling A Fehling B CuSO 4 1.73 g NaOH 2.5 g Nước cất 25 ml Muối Natri- kalitartrat 8.5 g Nước cất 25 ml ∗ Thuốc thử Stiasny Formol 36% 20 mlHCl đđ 10 ml 2.Cách thực hiện :2.1. - Xác định các chất tan trong dung dịch ether: Cân 10g bột nguyên liệu cho vào bình nón nút mài 250 ml,lắc với 45 ml dietyl ether trongvòng 30 phút ,lọc. - Dung dịch sẽ tách làm 2 lớp, lớpkiềm và lớp ether.a.Phân tích dung dịch kiềm :Dung dịch kiềm được cho vào bercher và trung hòa bằng dung dịch HCl 25 % đếntrung tính ,lọc. - Tủa được hòa vào 5ml dung dịch cồn 90 0 ,chia 3 ống nghiệm.-Ống 1: nhỏ vài giọt KOH 10% nếu có màu đỏ có hợp chất antraglycoside. - -Ống 2: acid hóa với HCl đđ, sau đó cho vào một ít Mg kim loại, nếu có màu đỏ cóflavonoid.-Ống 3: nhỏ một giọt vào giấy lọc ,hơ khô. - Nếu thấy trên giấy lọc để lại vết mờ có acid béo. - b.Phân tích dung dịch ether.Lớp dung dịch ether được rủa 3 lần bằng nước cất (20 mlx 3 lần) sau đó lắc 3 lầnvới dung dịch H 2 SO 4 2%( 5ml x 3 lần).Dung dịch acid được gộp lại làm phản ứng định tính alcaloid với:-Thuốc thử Mayer xuDrangendroff xuất hiện tủa cam-Thuốc thử Bouchardat xuất hiện tủa nâuDịch ether được chia làm 3 phần:-Phần 1: Loại dung môi nếu cắn có mùi thơm có tinh dầu-Phần 2: Nhỏ vài giọt H 2 SO 4 đđ nếu có màu xanh có caroteonid.-Phần 3: Hòa cặn với 10 giọt anhydric acetic cho vào ống nghiệm nhỏ ,nhỏtừ từ giọt H 2 SO 4 đđ theo thành ống nghiệm. - Nếu chỗ giáp giới có màu vàng lục haylục đỏ có phytosterol. - Xác định các chất tan trong dịch cồn Bã dược liệu sau khi chiết bằng ether đem chiết nóng bằng cồn 900 (5ml x 3 lần)tên bếp cách thủy ,lọc. - Phần 1: Pha loãng dung dịch cồn với thể tích nước cất, kiềm hóa bằng NH4OH đđ,lọc.-Tủa trên phễu hòa với 1 ml CHCl3,hứng vào ống nghiệm. - Sau đó cho vào 1 mlanhydric axetic và nhỏ từ từ giọt H2SO4 đđ, nếu dung dịch có màu xanh có steroid.-Dịch lọc được acid hóa bằng HCl,lọc. - Tủa trên phễu được hòa với 3-4 ml cồn900,chia làm 2 ống nghiệm:Ống 1: Cho vài giọt KOH 10% nếu có màu đỏ có anthtraglycosid.Ống 2: Cho vào 1 ít Mg kim loại và vài giọt HCl đđ nếu có màu đỏ cóflavonoid. - Phần 2: pha loãng dịch cồn với 1 thể tích nước cất rồi chia làm 2 ống nghiệm :Ống 1 :Trung tính bằng natri acetat ,sau đó thêm dung dích FeCl3 2%, nếu có màuxanh đen có Tanin.Ống 2: cho vào vài tinh thể Na 2 CO 3 ,nếu có sủi bọt có acid hữu cơ. - Phần 3: Dung dịch cồn được bốc hơi cách thủy trong chén sứ dến cạn, hòa cặn với 3ml nước cất đun nóng ,lọc. - Cho thêm vào nước lọc 4-5 giọt thuốc thử fehling A và 4-5giọt thuốc thử Fehling B đun cách thủy .Nếu có tủa đỏ gạch có đường khử. - Phần 4: Bốc hơi dung dịch cồn trong chén sứ đến cạn ,hòa cặn với 3ml nước cất đunnóng ,lọc .cho thêm vào nước lọc 4-5 giọt thuốc thử Fehing A và 4-5 giọt thuốc thửFehling B đun cách thủy.Nếu có tủa đỏ gạchPhần 5 : Dịch cồn được pha loãng với một thể tích nước ,chia làm hai ống nghiệmỐng 1: Acid hóa có màu đỏỐng 2: Kiềm hóa cho màu lụcSơ bộ nhận định có anthocyanisid ∗ Phần 6 :chia dịch cồn làm hai phần, bốc hơi cách thủy trong chén sứ :Chén 1: Hòa với 5 ml nước ,lắc mạnh nếu có bọt bền → có saponin Chén 2: Hòa vào chén 0.5 ml CHCl 3 và 0.5 ml anhydric acetic, rót vào ống nghiệm. - Nhỏ từ từ H 2 SO 4 đậm đặc, nếu:Có vòng tím → có saponin triterpenCó vòng xanh lục → có saponin steroid 2.3 Xác định các chất tan trong dung dịch acid: Bã dược liệu sau khi chiết với cồn 90 0 đem chiết nóng bằng H 2 SO 4 2% (50 ml x 3lần),lọc , chia dịch làm 5 phần
Xem thử không khả dụng, vui lòng xem tại trang nguồn hoặc xem
Tóm tắt