Nghiên cứu độc tính cấp và tác dụng chống viêm của bài thuốc EZ trên thực nghiệm

Chia sẻ: _ _ | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:5

Thêm vào BST

Báo xấu

19
lượt xem 1
download

Download Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ

Bài thuốc ẸZ là một bài thuốc Nam nghiệm phương có tốc dụng lượng huyết, sơ phong, trừ thấp theo y học cổ truyền đem lại hiệu quả tổt trong điều trị bệnh eczema trên lâm sàng nhưng chưa được chứng minh khoa học về độ an toàn. Đề tài đánh giá tác dụng chống viêm và chống dị ứng của bài thuốc EZ trên thực nghiệm.

Chủ đề:

Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!

Lưu

Nội dung Text: Nghiên cứu độc tính cấp và tác dụng chống viêm của bài thuốc EZ trên thực nghiệm

5. Kết quả điều trị theo thang điểm SCORAD Toàn phương gồm các vị thuộc huyết phận, tồ hợp thành một chỉnh thể bổ huyết mà không trệ huyềí, 90% 82 5 hành huyết mà không phá huyết, trong bỗ có tán, trong 75% tán có thu làm phần âm không bị hao tán. Lại có các vị 60% - bài trừ thấp nhiệt cả bên trong và bên ngoài, khiến 45% - thấp nhiệt có đường ra mà bệnh tình thuyên giảm. ự Ế Ti I\ u ì MẪM L .ư n ii 30% - 12.5 Bài thuốc Tứ vật tiêu phong ầm có hiệu quả ỉrong 15% H điều írị VDCĐ: điếm SCORAD giầm từ 42,8 ± 1 1 ,9 0% trước điều trị xuống còn 18,7 ± 8,3 sau điều trị (p < Khỏi Không hiệu Có hiệu quả 0,01). Bạch cầu ái toan giảm từ 13,2 ± 21,1 trước điều quả trị xuống còn 12,4 ±19,8 sau điều trị (p < 0,01). Kết quả chung: Khoi 5%, đỡ 82,5%, khổng kết quả: Biểu đồ 1. Kết quả điều trị theo điểm SCORAD 12,5%. BÀN LUẬN KIẾN NGHỊ Các triệu chứng lâm sàng như ngứa, khô da, mất 1. Đề tài nên được đánh giá thêm về thời gian ngù, ban đỏ, sẩn phù, xước da...đều có cải thiện theo dùng thuốc, về íỉ lệ tái phát bệnh sau khi dùng thuốc. chiều hướng tốt. Kết quả này là đo bài thuốc có các vị 2. Cần tiếp tục nghiên cứu sâu hơn để hiểu rõ cơ thục địa, sinh địa, đương quy, bạch thược phối hợp chế tác đụng của bài íhuốc đối với bênh VDCĐ. nhằm dưỡng huyết hòa dinh. Theo nguyên tắc “Trị TÀI LIỆU THAM KHẢO phong tiên trị huyết, huyết hành phong tất diệt”! 1. European Task Force on atopic dermatitis Phương thuốc lại cỏ các vị trừ thếp như: Kinh giới, (1993), “Severity Scoring of Atopic Dermatitis: The phòng phong: Khu phong, chi ngửa, có tác dụng khu SCORAD index", Dermatoiogy, Vol. 186:23-31. phong írừ thấp ngoài biếu. Bạch tiễn bỉ: Thanh nhiệt 2. Hanifiin IM, Rajka G: Diagnostic features of giải độc, khu phong trừ tháp là thuốc chủ yếu để trị atopic dermatitis. Acta Derm Venereo! (Stockh) bệnh ngứa naoài da. Bạch ỉiền bì, Thuyền thoái có tính 1980;supp9i 2:44-47. sơ phong thau chẩn, chỉ ngứa mà lại không làm hao 3. Ohtsuki, M. (2009), "Tacrolimus ointment for the tổn phần âm. Thương truật: kiện tỳ, trừ thấp phối hợp treatment of atopic dermatitis". Arerugi = [Allergy], với Kinh giới, Phòng phong giải trư ìhấp cả bên trong 58(5), 499-506 và bên ngoài, kiện íỳ sinh huyết làm cho da dè hồng 4. Pariser, D. (2009), "Topical corticosteroids and nhuận. Khổ sâm: trừ thấp nhiệt, khứ phong, chl ngứa topical calcineurin inhibitors in the treatment of atopic vào kinh can, đại trường vừa có tác dụng thanh nhiệt dermatitis: focus on percutaneous absorption". lại đưa thấp nhiệt ra ngoai. Thuyền thoái vào kinh Can, American journal of therapeutics, 16(3), 264-273. Phế để tán phong nhiệt, giải kinh trị phong chẩn. Bạch 5. Châu Văn Trờ (2013) "Nghiên cứu siêu kháng tật lê: Hoạt huyết, khu phong, bình can giải uất, chỉ nguyên của tụ cầu vàng và hiệu quả điều trị viêm da ngứa. Địa phu tử vào kinh Thận, Bàng quang có tác cơ địa bằng kháng sinh cefuroxime”, Luận án tiến s ĩy dụng lợi tiểu tiện, bài trừ thấp nhiệt ra ngoài. học, tr 5-25. Nhóm nghiên cứu: DS. Lê Thị Minh, Đ ại học D ược Hà Nội; BS. Nguyên Trường Nam, Bộ m on Y lý, Học viện Y - ỏ ư ợ c h ọ c c ổ Ưuyền Việt Nam Nhóm hư ớ ng d ẫ n :ĨS . Đậu Xuân Cảnh, Học viện Y -D ư ợ c học c ồ truyền Việt Nam; PGS.TS. Phùng Hòa Bình, Đ ại học D ược Hà Nội; PGS.TS.Nguyễn Mạnh Tuyển, Đ ại học Dược Hà Nội. TÓM TẮT Bài thuốc ẸZ là một bài thuốc Nam nghiệm phương có tốc dụng iương huyết, sơ phong, trừ thấp theo y học cổ truyền đem lại hiệu quả tổt trong điều trị bệnh eczema trên lâm sàng nhưng chưa được chứng minh khoa học về độ an toàn. M ục tiêu: Đánh giá tác dụng chống viêm và chống dị ứng của bài thuốc EZ trên thực nghiệm. Phương pháp nghiên cứ u: Đổrth già iác dụng chống viêm bằng phương phốp của Tubaro, Winter, Ducroi và cộng sự, xàc đính tác dụng chống dị ứng trên chuột nhắt trắng dong Swiss. K ết quả: Cao đặc chiết bang ethanol liều 6.33g cao/kg TT chống viêm cấp tốt hơn 2.11g cao/kg 7T; cao đặc sắc nước liều 3.54g cao/kg TT có tác dụng chống viêm cấp. Cà hai loại cao liều 2.11g cao/kg TTđều chống viêm mạn. Cao đặc sắc nước liều 3.54g cao/kg và 10.62g cao/kg ức chế phàn xạ gãi và ức chế phù chân. Cao đặc chiềt bằng ethanol liều 2.11g cao/kg ức chế phản xạ gãi và phù chân. K ết luận: Bài thuốc EZ có liều độc tính cấp, ức chế quá trình viêm và dị ứng trên chuột nhắt trang. Từ khóa: Y học cổ truyền Việt Nam (YHCTVN); Thuốc nam; Eczema; Bài thuốc EZ. - 184 -
studying the acute toxicology anti-inflammatory effect of the EZ remedy on experiment Researchers: DS . Le Thi Minh, Hanoi University of Pharmacy; BS . Nguyen Truong Nam, Department of Medicine, Institute of Medicine - Traditional pharmacy Vietnam Group guidance : D r . Dau Xuan Canh , Institute of Traditional Medicine and Pharmacy Vietnam ; Assoc Phung Hoa B in h, Hanoi University of Pharmacy; Dr. Nguyen Manh Tuyen, Hanoi University of Pharmacy. SUMMARY The Vietnamese experienced remedy EZ associated with cooling hot blood and decreasing wind effects associated with the traditional medicine theories has been bringing possitive clinical outcomes in treating Eczema, however Its safety has not been proven scientifically. Objective: The research examines the acute toxicology and the anti - inflammatory on experimental animals. Materials and methods: Evaluating the acute toxicology o f EZ extract (water and ethanol) by the Litchfield’s method as well as Estimating the anti-inflammatory effect by methodologies o f Tubaro, Winter, Ducrot and coworkers on Swiss mouse. Results: Both water and ethanol EZ extract are not toxic with the clinical doses. Ethanol EZ extract with dose o f 6.33g/kg more effectively reduces acute inflammatory than dose o f 2.11 g/kg, water EZ extract alleviates acute imflammation with dose o f 3.54g/kg. Dose o f 2.11g/kg o f ethanol EZ extract as well as water EZ extract brings about a positive impact on chronic inflammation. Conclusion: The research has initially shown out the dose o f acute toxicology, the effect of antiinflammatory and anti-allergy o f the EZ remedy. Keywords: Traditional Vietnamese Medicine (TVM), traditional herbs, Eczema, EZ extract ĐẬT VÁN ĐỀ dầu croton (sigma - Đức), compound 48/80 Eczema (bệnh chàm) !à trạna thái viêm lớp nông (Singapore)... của da cấp tính hay mạn tính, tiễn triển từng đợt hay * Đ ôi tứợng nghiên cớu tái phái nhiều đợt, điều trị khó khãn. Eczema có nhiều Chuột nhắt trăng dòng Swiss, hai giống khỏe thề lâm sàng, tuy nhiên hay gặp nhất là viêm da cơ địa mạnh, trọng lượng từ 18-22g/con: do Viện Vệ sinh (aíopic dermatitis hay atopic eczema - AD) [1], [3]. dịch tễ Truna ương cung cấp, được nuôi trước một Theo Y học cổ truyền (YHCT), bệnh thuộc phạm trù tuần trong điêu kiện đầy đủ thức ăn, nước uống theo chứng "phong chẩn". Pháp tri chu yếu là sơ phong, tiêu chuẩn của phòng thí nghiệm bộ môn Dược lý - ỉhanh nhiệt, trừ thấp [3]. Trường Đại học Y Hà Nội. Bài thuốc nghiệm phương EZ của PGS. TS. Phùng 2. Phương pháp nghiên cứu Hòa Bình gồm chủ yểu các vị thuốc nam quý như kim * Nghiên cứu độc tính ngân, hòe hoa, đơn lá đỏ... có tác dụng lương huyết, Xác định LD50 của cạo EZ sắc nước và chiết sơ phong, thanh nhiệt đã được sử dụng nhiều năm tại Ethanii trên chuột nhắt trắng bằng đường ống theo Phòng chẩn trị Đông y Phùng Gia Đường mang lại phương pháp Litchfield - Wiicoxon, quy định của WHO hiệu quả điều trị lâm sang tốt cho bệnh nhân Eczema và Quy chế Đánh giá tính an toàn và hiệu lực thuốc cổ thể viêm da cơ địa. truyền của Bộ Y tế [2][6]. Để có cơ sờ đưa bài thuốc áp dụna rộng rãi trong Trước khi tiến hành thí nghiệm, cho chuột nhịn ăn lâm sàng điều trị Eczema, chúng tôi tiễn hành nghiên qua đêm. cứu bài thuốc trên động vật thực nghiệm với mục tiêu: Từng lô chuột nhắt trắng, mỗi lô 10 con, được uống Nghiên cửu độc tính và đành giá tác dụng chổng viêm thuốc thử theo liều tăng dẫn từ liều thấp nhất đến ỉiều của bài thuốc EZ. cao nhất, uống 3 lần/24 giờ, mỗi lần cách nhau 2 giờ. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIẾN cứ u Tlm iiều cao nhất không gây chết chuột (0%), liều thấp 1. Chất liệu, phương tiện và đối tượng nghiên nhất gây chết chuột hoàn toàn (100%) và các liều cứu trung gian. * Chất liệu nghiên cứu. Theo dõi tinh trạng chung của chuột và số lượng - Công thức bài thuốc EZ: Kim ngân đằng (Caulis chuột chết mỗi lô trong 72 giờ. Sau đó tiếp tục theo dõi cum folium Lonicerae) 20g, Hòe hoa (Flos styphnolobii tình trạng của chuột đến het ngày thứ 7 saũ khi uống japonic! imaturi) 10g, Đơn lá ổỏ (Folium Excoecariae) thuốc. ’ 5g, Núc nác (Cortex Oroxyli) 15g, Thương nhĩ tử * Tác dụng chống viêm cấp bằng phương pháp (Fructus Xanthii strumarii) 7g, Hoàng bá (Cortex gây viêm ỉa! chuột Phellodendri) 3g. Nghiên cứụ ổược tiến hành theo mô hình gây viêm - Dạng thuốc sử dụng: cao đặc chiết bằng eíhanol ở tai chuột nhắt trắng bằng dầu croton theo mô tả bởi 70% và cao đặc sắc nước tỉ lệ 1:1. Tubaro và cộng sự (1985) [5]. - Thuốc được bào chế tại Viện Nghiên cứu Y Dược * Tác dụng chống vỉem cấp bằng phương pháp cổ truyền Tuệ Tinh đạt tiêu chuẩn dược điển Việt nam gây phù IV. Phương pháp nghiên cứu gây phù chân chuột * Phương tiện và trang thiết bị dùng trong bằng carrageenin theo w inter và cộng sự. [7] nghiên cứu: Tác nhan gây phù chân chuột ỉà carrageenin. Gây Các dụng cụ đo lường đạt tiêu chuẩn, cân phân phù bằng cách tiem dưới da dung dịch carrageenin. tích, cận kỹ thuât, máy ảnh số Canon, máy xay dược Đo thẻ tích bàn chân trước vồ sau khi tiêm (2 giờ, 4 iiệu, nồi sắc thuốc Hàn Quốc, ỉủ sấy Memrriert, máy đo giờ, 6 giờ và 24 giờ). Tính kết quả trung binh và so viêm Plethysmometer No 7250, amiant, carrageenin, sánh.
- Tiến hành: Chuột được uống thuốc 4 ngày iiên tiếp trước khi gây viêm. Ngày thứ 4, sau khi uống thuốc thử 1 giờ7 chuột được gây viêm bằng cách tiêm 0.05ml carrageenin i% /chuột vào gan bàn chân sau, bên phài của chuột. Chân trái không tiêm. Đo thể tích chân chuột (đến khởp cổ chồn) bằng dụna cụ chuyên biệt vào các thời điểm: trước khi aây viêm (V0), sau khi gây viêm 2 giở (V2), 4 giờ (V4), 6 giờ (V6) vả 24 giờ (V24). Kết quả tính theo công thức của Fontaine. * Tác dụng chống vỉenri mạn theo phupơng pháp gây u hạt - Phương pháp: Phương pháp gây u hạt trên chuột nhắt trắng bang amiant theo phương pháp của Ducròt, Julou và cộng sự (1963) [5]. Biểu đồ 1. Mối Hôn quan tuyến tính giữa liều và tỷ Tiến hành cấy sợi amiant (đã được tầm lệ chuột chết sau khi uống cao đặc sắc nước EZ carrageenin 1%) vào saũ gáy trên cua mỗi côn chuột để gây viêm mạn. Từ kết quả bảng 1 và biểu đồ 1 tính được LD50 = Sau khi cáy u hạt, các chuột được uống nước cất 63,19g cao/kgTT. hoặc thuốc thử liên tục trong vòng 7 ligày. Bảng 2. Tương quan liều lượng và tỷ lệ chuột chết Đến ngày thứ 8, tiến hành giết chuột, bóc tách khối sau khi uống cao đặc chiẻt ethanol _________ u hạt Chọn ngẫu nhiên mỗi lô 3 khối U hạt để làm xét Thế tích Liều Liều(g Lô Tỷ lệ chuột nghiệm giầi phẫu bệnh vi thể. cao (g dược cao/kgTT) chuột chểt (%) Sau đó khối u được sấy khô ở nhiệt độ 56°c trong (mi) iiệu/kgTT) 18 giờ. Cân trọng lượng u hạt sau khi đã được sấy 1 20 200 29,33 0 khôT So sánh trọng lượng trung bình của khối hật giữa 2 25 250 36,67 0 3 30 300 44 10 các lô uống thuốc và lô chứng. Tác dụng chống viêm 4 35 350 51,33 20 được tính bằng tỷ !ệ % giàm trọng lượng khổi u. 5 40 400 58,67 40 KẾT QUẢ NGHIẾN CỨU VÀ BÀN LUẬN 6 45 450 66 60 1. Nghiên cứu độc tính 7 50 500 73,33 80 Bảng 1. Tương quan liều lượng và tỷ lệ chuột chết 8 55 550 80,67 90 sau khi uống cao đặc sắc nước 9 60 600 88 100 - Cao đặc chiềt ethanol: Sau khi uổng cao đặc Thế tích Liêu Liều(g chiết ethanol, chuột trong các lô uổng liều thấp dưới Lô Tỷ lệ chuột cao (g dược cao/kg) chuột chết (%) 33g cao (tương đương 227g dược liệuVkg TT không (mi) liệu/kgTT) 25 112,50 27,65 0 có hiện từợng gì đặc biệt: chuột ăn uống, vận động 2 30 135,00 33,18 0 bình thường, chuột không bị khó thở, đi ngoài phân 3 35 157,50 38,72 10 khô, không tháy xiiất hiện chuột chểt trong vòng 72 giờ 4 40 180,00 44,25 20 sau khỉ uống thuốc thử. Các lổ chuột uống liều từ 40g 5 55 247,50 60,84 30 cao (tương đương 272,40g được liệu)/kg TT chuột 6 60 270,00 66,37 40 các chuột aiảm vận động, ăn uống ít, một số chuột bị 7 65 292,50 71,90 50 đi ĩa và xuất hiện chuột chết trong vòng 72 giờ. 8 70 315,00 77,43 90 9 75 337,50 82,97 100 150 ; ............................................. t ■ - Cao đặc sắc nước: Sau khi uống cao đặc sắc f 100 I........y - Q.2831x-68.95.......... ............................ nước, chuột trong các lô uống liều tháp 30g caó/kgTT (tương đữơng 121,80g dược liệu) không có hiện 2 _ I R1 = 0.9693 tượng gì đặc biệt: ăn uổng, vận động bình thường, f 50 ị chiiột không bị khó thở, đi ngoài phân khô, không thay ọ 200400600800 -50 ' ......... ............... .................................... (tương đương 142,1 Og dưực liệu), các chuột giảm vận Liều (g/kg) động, ăn uống ít, một số chuột bị đi ngoài và xuất hiện chupt chết trong vòng 72 giờ. Biểu đồ 2 Mối liên quan tuyến tính giữa liều và tỷ lệ chuột chết sau khi uống cao đặc chiết ethanol Từ kêí quá bảng 2 và biểu đồ 2 tỉnh được LD50 = 61,65g cao/kgTT
2. Tác dụng chống viêm * Tác dụng chống viêm cấp bằng phương pháp gây viêm tai Bảng 3. Chiều dày và khối lượng tai chuột trước vả sau gây vièm 6h Chiều dày tai chuột Khối lượng íai chuột p Liều thử TT Lô thử n ( x± SD, ụm) { x i SĐ.ug) • /kgTT Trước Sau 6h Tai phải Tai trái Mô hình 0,2ml 0,05 2 10 21,00 ±4,32 23,40 ±3,12* 17,60 ± 3,31+* 12,90 ± 1,45 (Methylprednisolon) Cao đặc chiêt ethanol !iều 2,11g cao
cấp tốt hơn liều 2,11g cao/kg TT. Tác dụng này tương 12/3/1996 1996 đương aspirin liều' 200 mg/kg. [3] Bộ mòn ỸHCT - Đại họo Y Hà Nội (2008), Bài - Cao đặc sắc nước liều 3,540,05). Atorvastatin 100mg/kg yả HSN đều làm tăng nồng độ HDL-C rõ rệt so với lô chứng sinh học (p