Nghiên cứu các đặc tính của gelatinase tái tổ hợp và ứng dụng trong thủy phân da cá da trơn thành acid amin làm nguyên liệu sản xuất thực phẩm chức năng.

- ĐÀO VĂN NGUYÊN NGHIÊN CỨU CÁC ĐẶC TÍNH CỦA GELATINASE TÁI TỔ HỢP VÀ ỨNG DỤNG TRONG THỦY PHÂN DA CÁ DA TRƠN THÀNH ACID AMIN LÀM NGUYÊN LIỆU SẢN XUẤT THỰC PHẨM CHỨC NĂNG LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Hà Nội - 2015 MỤC LỤC BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI.
- ĐÀO VĂN NGUYÊN NGHIÊN CỨU CÁC ĐẶC TÍNH CỦA GELATINASE TÁI TỔ HỢP VÀ ỨNG DỤNG TRONG THỦY PHÂN DA CÁ DA TRƠN THÀNH ACID AMIN LÀM NGUYÊN LIỆU SẢN XUẤT THỰC PHẨM CHỨC NĂNG CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT: CÔNG NGHỆ SINH HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: 1.
- NỘI DUNG NGHIÊN CỨU.
- Nghiên cứu các đặc tính vật lý, hóa học của gelatinase tái tổ hợp.
- Nghiên cứu các điều kiện thủy phân da cá da trơn thành acid amin bằng gelatinase tái tổ hợp.
- Nghiên cứu đánh giá các chỉ tiêu về an toàn thực phẩm của acid amin thủy phân ( vi sinh vật, độc tính cấp tính, độc tính bán trƣờng diễn.
- ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU.
- THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU.
- Thành phần thủy phân từ da cá.
- VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU.
- VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU.
- PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU.
- Nghiên cứu đặc tính vật lý, hóa học của gelatinase tái tổ hợp.
- Phƣơng pháp xác định ảnh hƣởng của các ion kim loại và hóa chất đến hoạt tính của gelatinase tái tổ hợp.
- Phƣơng pháp xác định nhiệt độ thích hợp cho hoạt tính và độ bền nhiệt của gelatinase tái tổ hợp.
- Phƣơng pháp xác định pH thích hợp cho hoạt tính của gelatinase tái tổ hợp.
- Phƣơng pháp đánh giá ảnh hƣởng của chất tẩy rửa đến hoạt tính của gelatinase tái tổ hợp.
- Phƣơng pháp đánh giá ảnh hƣởng của dung môi hữu cơ đến hoạt tính của gelatinase tái tổ hợp.
- Phương pháp tiền thủy phân hóa học da cá da trơn.
- Phƣơng pháp xác định ảnh hƣởng của nồng độ enzyme đối với khả năng thủy phân của enzyme gelatinase tái tổ hợp đối với mẫu da cá đã xử lý qua dung dịch kiềm NaOH 2M.
- Phƣơng pháp xác định ảnh hƣởng của pH đối với khả năng thủy phân của enzyme gelatinase tái tổ hợp đối với mẫu da cá tra/ ba sa đã qua tiền xử lý bằng dung dịch kiềm NaOH 2M.
- Phƣơng pháp xác định ảnh hƣởng của nhiệt độ đến hiệu quả thủy phân.
- Phƣơng pháp xác định ảnh hƣởng của thời gian đến hiệu quả thủy phân.
- Nghiên cứu đánh giá các chỉ tiêu về an toàn thực phẩm của acid amin thủy phân.
- Xác định tổng số vi sinh vật hiếu khí: TCVN ISO 4833:2003.
- Xác định Salmonella sp: TCVN ISO 06579:2002.
- Xác định Staphylococcus sp: TCVN ISO With Amd.
- Phƣơng pháp xác định độc tính cấp tính.
- Phƣơng pháp xác định độc tính bán trƣờng diễn.
- Xác định một số đặc tính vật lý, hóa học của gelatinase tái tổ hợp.
- Ảnh hƣởng của các ion kim loại và hóa chất đến hoạt tính của gelatinase tái tổ hợp.
- Ảnh hƣởng của nhiệt độ và độ bền nhiệt của gelatinase tái tổ hợp.
- Ảnh hƣởng của pH đến hoạt tính của enzyme gelatinase tái tổ hợp.
- Ảnh hƣởng của chất tẩy rửa đến hoạt tính của gelatinase tái tổ hợp.
- Ảnh hƣởng của dung môi hữu cơ đến hoạt tính của gelatinase tái tổ hợp.
- Các điều kiện thủy phân da cá da trơn thành acid amin bằng gelatinase tái tổ hợp.
- 44 III.2.1 Các điều kiện tiền thủy phân da cá.
- Kết quả xác định nhiệt độ tiền thủy phân da cá tra/basa.
- Kết quả xác định pH tiền thủy phân da cá tra/basa.
- Kết quả xác định thời gian tiền xử lý da cá tra/basa.
- Ảnh hƣởng của nồng độ enzyme đến quá trình thủy phân da cá bằng enzyme gelatinase tái tổ hợp.
- Ảnh hƣởng của chất kiểm soát pH đến quá trình thủy phân da cá bằng enzyme gelatinase tái tổ hợp.
- Kết quả khảo sát ảnh hƣởng của nhiệt độ đến hiệu suất thủy phân.
- Kết quả khảo sát ảnh hƣởng của thời gian đến hiệu suất thủy phân.
- Phân tích thành phần axit amin trong sản phẩm thủy phân.
- Đánh giá các chỉ tiêu về an toàn thực phẩm của acid amin thủy phân.
- Kết quả kiểm tra các chỉ tiêu vi sinh vật.
- Xác định mật độ vi sinh hiếu khí tổng số.
- Kết quả xác định độc tính cấp tính trên chuột nhắt trắng [3,4.
- Kết quả xác định độc tính bán trƣờng diễn.
- Xác định được một số đặc tính vật lý, hóa học của enzyme gelatinase tái tổ hợp như sau: 66 4.1.2.
- Kiểm tra các chỉ tiêu vi sinh, độc tính của mẫu acid amin thủy phân từ da cá tra/cá basa.
- Hà Nội, tháng 9 năm 2015 Ngƣời viết luận văn Đào Văn Nguyên 8 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của nhóm nghiên cứu và tôi, nằm trong nhánh nhỏ của đề tài “ Nghiên cứu công nghệ sản xuất gelatinase tái tổ hợp và ứng dụng trong công nghệ thực phẩm, mỹ phẩm.
- 26 Bảng 4 - Ảnh hƣởng các ion kim loại và hóa chất đến hoạt tính của gelatinase tái tổ hợp.
- 39 Bảng 5: Thành phần acid amin trong dịch thủy phân.
- 50 Bảng 6a: Kết quả xác định mật độ tổng số vi khuẩn hiếu khí trong mẫu.
- 51 Bảng 6b: Kết quả xác định mật độ E.
- 51 Bảng 7: Kết quả xác định mật độ Salmonella và Staphylococcus.
- 23 Hình 8.a Ảnh hƣởng của nhiệt độ đến hoạt tính của gelatinase.
- 41 Hình 8.b Ảnh hƣởng của thời gian xử lý nhiệt đến hoạt tính của gelatinase.
- 41 Hình 9 - Ảnh hƣởng của pH đến hoạt tính của gelatinase tái tổ hợp.
- 42 Hình 10 - Ảnh hƣởng của các chất tẩy rửa đến hoạt tính.
- 43 của gelatinase tái tổ hợp.
- 43 Hình 11 - Ảnh hƣởng của các dung môi hữu cơ đến hoạt tính của gelatinase.
- Ảnh hƣởng của nhiệt độ tiền thủy phân da cá tra/cá basa.
- 45 Hình 13 - Ảnh hƣởng của độ pH dịch thủy phân đến hiệu quả tiền xử lý.
- 46 Hình 14 - Ảnh hƣởng của thời gian tiền thủy phân tới hiệu quả thủy phân.
- 46 Hình 15 - Ảnh hƣởng của nồng độ enzyme đến hiệu suất thủy phân.
- 47 Hình 16- Ảnh hƣởng của pH đến hoạt động của enzyme gelatinase tái tổ hợp trong quá trình thủy phân da cá tra/ ba sa đã qua tiền xử lý kiềm.
- 47 Hình 17 - Ảnh hƣởng của nhiệt độ đến hiệu suất thủy phân.
- 49 Hình 18 - Ảnh hƣởng của thời gian đến hiệu suất thủy phân.
- 64 Hình 22 - Mô học sinh thiết thận chó sử dụng bột amino acid thủy phân.
- Trong sản xuất hiện đại ngày nay, enzyme tái tổ hợp nói riêng và enzyme nói chung đang là hƣớng đi mới đƣợc ứng dụng vào nhiều ngành khác nhau đem lại hiệu quả chuyển hóa cơ chất nhanh hơn rất nhiều lần so với phƣơng pháp hóa học trƣớc kia, phản ứng xảy ra trong điều kiện êm dịu, đặc biệt an toàn với con ngƣời – thân thiện với môi trƣờng.
- Gelatinase là một trong những enzyme đƣợc nghiên cứu hiện nay để có thể thủy phân gelatin.
- Gelatin là một loại protein không mùi, không vị, trong suốt hoặc có màu hơi vàng, chúng bị thủy phân ở enzyme gelatinase.
- Vì vậy, sản xuất enzyme tái tổ hợp đang là hƣớng đi mới và có thể giải quyết triệt để bài toán an toàn cho môi trƣờng.
- Với những yêu cầu trên, chúng tôi tiến hành đề tài “ Nghiên cứu các đặc tính Gelatinase tái tổ hợp và ứng dụng trong thủy phân da cá da trơn thành acid amin làm nguyên liệu sản xuất thực phẩm chức năng.
- Nhằm mong muốn ứng dụng thành công nghiên cứu này vào sản xuất gelatinase tái tổ hợp đảm bảo an toàn cả về chất lƣợng lẫn số lƣợng để có thể giải quyết một phần phụ phẩm của ngành công nghiệp chế biến cá da trơn của nƣớc ta hiện nay.
- Mục tiêu chung Xác định đƣợc các đặc tính vật lý, hóa học của gelatinase tái tổ hợp để làm cơ sở cho việc ứng dụng enzyme trong thủy phân da cá da trơn thành nguyên liệu sản xuất thực phẩm chức năng 2.2.
- Xác định đƣợc đặc tính vật lý, hóa học của gelatinase tái tổ hợp 2.2.2.
- Nghiên cứu các điều kiện thủy phân da cá da trơn thành acid amin bằng gelatinase tái tổ hợp 2.2.3.
- Nghiên cứu đánh giá các chỉ tiêu về an toàn thực phẩm acid amin thủy phân.
- NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 3.1.1.
- Nghiên cứu các đặc tính vật lý, hóa học của gelatinase tái tổ hợp 3.1.1.1.
- Xác định hoạt lực enzyme với các điều kiện nhiệt độ, pH, có mặt các ion kim loại 15 3.1.1.2.
- Xác hoạt tính, độ bền nhiệt độ, độ bền pH của gelatinase tái tổ hợp 3.1.2.
- Nghiên cứu các điều kiện thủy phân da cá da trơn thành acid amin bằng gelatinase tái tổ hợp 3.1.2.1.
- Nghiên cứu các điều kiện tiền thủy phân da cá da trơn ( cá tra/ cá basa ) 3.1.2.2.
- Nghiên cứu ảnh hƣởng của nhiệt độ đến hiệu quả thủy phân da cá tra/ cá basa 3.1.2.3.
- Nghiên cứu ảnh hƣởng của thời gian đến hiệu quả thủy phân da cá tra/ cá basa 3.1.3.
- Nghiên cứu đánh giá các chỉ tiêu về an toàn thực phẩm của acid amin thủy phân ( vi sinh vật, độc tính cấp tính, độc tính bán trƣờng diễn ) 3.1.3.1.
- Nghiên cứu đánh giá các chỉ tiêu vi sinh vật của sản phẩm bột acid amin thủy phân 3.1.3.2.
- Nghiên cứu đánh giá khả năng gây độc tính cấp của sản phẩm acid amin trên động vật thí nghiệm 3.1.3.3.
- Nghiên cứu đánh giá khả năng gây độc tính bán trƣờng diễn của sản phẩm acid amin trên động vật thí nghiệm.
- ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU Đối tƣợng nghiên cứu: Gelatinase tái tổ hợp 5.
- THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU 5.1.
- Thời gian nghiên cứu: Đề tài đƣợc thực hiện từ tháng 09 năm 2014 đến tháng 09 năm 2015 5.2.
- Địa điểm nghiên cứu: Phòng thí nghiệm của khoa Công Nghệ Sinh Học, Viện Đại Học Mở Hà Nội.
- 16 PHẦN II – NỘI DUNG CHƢƠNG I.
- Theo Hofmeister: Gelatin là sản phẩm của sự thủy phân Collagen bởi nhiệt: C102H149N31O38 (collagen

Xem thử không khả dụng, vui lòng xem tại trang nguồn
hoặc xem Tóm tắt