Nghiên cứu phân tích đánh giá hàm lượng kháng sinh họ betalactam trong đối tượng dược phẩm và sinh học bằng phương pháp phân tích hiện đại

- Nghiên cứu phân tích đánh giá hàm lượng kháng sinh họ betalactam trong đối tượng dược phẩm và sinh học bằng phương pháp.
- phân tích hiện đại.
- Luận án TS Chuyên ngành: Hoá Phân tích.
- Nghiên cứu và chọn các điều kiện tối ưu như các thông số của máy, pha tĩnh, pha động… để tách và xác định đồng thời 5 kháng sinh họ betalactam bằng kỹ thuật RP- HPLC với detector UV.
- Đánh giá phương pháp phân tích và ứng dụng phân tích các mẫu dược phẩm, mẫu nước tiểu.
- Nghiên cứu điều kiện tối ưu tạo dẫn xuất phát huỳnh quang của các betalactam với thuốc thử 7-Fluoro-4-nitrobenzo-2-oxa-1,3- diazole (NBD-F) để tách và xác định đồng thời 3 kháng sinh betalactam bằng kỹ thuật RP- HPLC/ detector huỳnh quang, đánh giá phương pháp phân tích.
- Ứng dụng phương pháp RP- HPLC/ detector huỳnh quang có độ nhạy và độ chọn lọc cao để phân tích các mẫu dược phẩm và đặc biệt là phân tích các mẫu sinh học: nước tiểu và mẫu huyết thanh.
- Nghiên cứu tìm và chọn những điều kiện tối ưu như thông số máy điện di mao quản, kích thước mao quản, thế áp vào 2 đầu mao quản, dung dịch đệm điện di để tách và xác định đồng thời 7 chất kháng sinh betalactam bằng kỹ thuật điện di mao quản điện động học mixen.
- Ứng dụng phương pháp điện di mao quản điện động học mixen xác định hàm lượng kháng sinh betalactam trong mẫu dược phẩm và mẫu nước tiểu Keywords.
- Hóa phân tích.
- Thuốc kháng sinh.
- Dược phẩm.
- Phương pháp phân tích hiện đại..
- Các kháng sinh là thuốc thiết yếu trong y học hiện đại, nhờ các thuốc kháng sinh mà y học có thể loại bỏ được các dịch bệnh nguy hiểm đối với con người và động vật như dịch hạch, dịch tả, thương hàn và điều trị hiệu quả nhiều loại bệnh gây ra bởi vi khuẩn.Từ khi Alexander Fleming tìm ra penicillin (1928) thì việc điều trị các bệnh nhiễm khuẩn có những tiến bộ rất lớn, kháng sinh đã giúp điều trị được nhiều bệnh hiểm nghèo, mang lại sự sống cho con người mà trước đó y học không có khả năng chữa trị..
- Đối với các nước đang phát triển, thuốc kháng sinh lại giữ một vị trí rất quan trọng, vì các nước này do điều kiện vệ sinh kém và mức sống còn thấp nên thường xảy ra các dịch tả, kiết lị, nhiễm khuẩn đường hô hấp… Ở nước ta có một số tài liệu công bố các kháng sinh chiếm 25-30% tổng số thuốc sử dụng hàng năm mà hiện chưa có một tài liệu chính xác nào công bố về việc điều tra chi tiết vấn đề này, nhưng chắc chắn các thuốc kháng sinh là các thuốc được sử dụng nhiều nhất ở nước ta và ở các nước đang phát triển, còn ở các nước Châu Âu và Nhật Bản… thì các nhóm thuốc được sử dụng nhiều nhất lại là thuốc điều trị tim mạch, các thuốc điều trị các bệnh thần kinh- tâm thần, các thuốc chống viêm và các thuốc giảm béo..
- Kháng sinh họ β-lactam gồm rất nhiều loại như: Penixilin, Ampixilin, Amoxilin … với vô số các tên biệt dược khác nhau, các loại kháng sinh trên có thể đơn độc hoặc được kết hợp với một số hóa chất khác như Augmentin (gồm Amoxilin và muối của axit Clavulanic), Unasyn (gồm Ampixilin và Sulbactam).
- Tuy nhiên, sự lạm dụng kháng sinh, sử dụng kháng sinh không đúng liều lượng và cách dùng kháng sinh không đúng sẽ dễ bị vi khuẩn nhờn thuốc, kháng thuốc, từ đó việc chữa trị càng khó khăn [2].
- Vì vậy, kiểm soát và phân tích thuốc kháng sinh đối với người bệnh là biện pháp cần thiết để nâng cao hiệu quả sử dụng chúng.
- Mặt khác bằng việc phân tích hàm lượng kháng sinh trong máu, hay trong nước tiểu ta có thể biết được hàm lượng kháng sinh nó tồn tại trong cơ thể là bao nhiêu, có đủ hàm lượng để tiêu diệt vi khuẩn hay không, từ đó có được phác đồ điều trị hợp lý..
- Có rất nhiều phương pháp phân tích hàm lượng kháng sinh trong các mẫu sinh học như quang phổ hấp thụ phân tử UV-Vis, phương pháp von-ampe hòa tan, sắc ký lỏng hiệu năng cao với nhiều detector khác nhau, đặc biệt là phương pháp điện di mao quản mới được phát triển gần đây.
- Vì vậy việc nghiên cứu lựa chọn phương pháp phân tích đảm bảo độ đúng, độ chọn lọc, chi phí phân tích không cao, đơn giản, có thể áp dụng để kiểm tra song hành với các phương pháp trong dược điển là cần thiết và có ý nghĩa thực tiễn.
- Trong số các phương pháp.
- phân tích công cụ hiện đại đó thì phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao và điện di mao quản có nhiều lợi thế, có thể đáp ứng được yêu cầu đặt ra, vì vậy chúng tôi chọn phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao và điện di mao quản để tách và xác định kháng sinh β-lactam.
- Hơn nữa ở nước ta phương pháp điện di mao quản chưa được nghiên cứu nhiều.
- Xét về hiệu quả tách và thời gian phân tích, phương pháp điện di mao quản có rất nhiều lợi thế nên gần đây các nhà khoa học bắt đầu quan tâm tới phương pháp này.
- Do đó chúng tôi chọn đề tài: “Nghiên cứu phân tích đánh giá hàm lượng kháng sinh họ betalactam trong đối tượng dược phẩm và sinh học bằng phương pháp phân tích hiện đại”, đây là đề tài có tính thực tiễn, cấp thiết khoa học và phù hợp với tình hình phát triển kinh tế của nước ta hiện nay..
- Xuất phát từ những vấn đề trên, mục tiêu của luận án đặt ra là nghiên cứu và tối ưu các điều kiện của kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu năng cao, điện di mao quản để tách và định lượng đồng thời một số kháng sinh họ β-lactam trong đối tượng dược phẩm và sinh học, nhằm tìm phương pháp phù hợp để phân tích β-lactam trong các mẫu sinh học, đặc biệt là trong nước tiểu..
- NỘI DUNG NGHIÊN CỨU CỦA LUẬN ÁN BAO GỒM:.
- (1) Nghiên cứu và chọn các điều kiện tối ưu như các thông số của máy, pha tĩnh, pha động… để tách và xác định đồng thời 5 kháng sinh họ betalactam bằng kỹ thuật RP- HPLC với detector UV.
- Đánh giá phương pháp phân tích và ứng dụng phân tích các mẫu dược phẩm, mẫu nước tiểu..
- (2) Nghiên cứu điều kiện tối ưu tạo dẫn xuất phát huỳnh quang của các betalactam với thuốc thử 7-Fluoro-4-nitrobenzo-2-oxa-1,3-diazole (NBD-F) để tách và xác định đồng thời 3 kháng sinh betalactam bằng kỹ thuật RP- HPLC/ detector huỳnh quang, đánh giá phương pháp phân tích..
- (3) Ứng dụng phương pháp RP- HPLC/ detector huỳnh quang có độ nhạy và độ chọn lọc cao để phân tích các mẫu dược phẩm và đặc biệt là phân tích các mẫu sinh học: nước tiểu và mẫu huyết thanh..
- (4) Nghiên cứu tìm và chọn những điều kiện tối ưu như thông số máy điện di mao quản, kích thước mao quản, thế áp vào 2 đầu mao quản, dung dịch đệm điện di để tách và xác định đồng thời 7 chất kháng sinh betalactam bằng kỹ thuật điện di mao quản điện động học mixen..
- (5) Ứng dụng phương pháp điện di mao quản điện động học mixen xác định hàm lượng kháng sinh betalactam trong mẫu dược phẩm và mẫu nước tiểu..
- Điểm mới về khoa học của luận án: Phương pháp tách và xác định đồng thời kháng sinh họ betalactam đây là nghiên cứu đầu tiên ở Việt Nam có tính chất hệ thống, phương pháp.
- sắc ký lỏng hiệu năng cao với detector huỳnh quang để phân tích kháng sinh betalactam trong mẫu sinh học ở nước ta chưa có công trình nào đề cập tới, đặc biệt phương pháp điện di mao quản (MEKC) tiến hành phân tích đồng thời 7 chất kháng sinh betalactam trong mẫu dược phẩm và nước tiểu cũng chưa có công trình nào công bố..
- Lê Thị Huyền Dương (2000), Tách và phân tích đồng thời một số chất quan trọng trong nhóm vitamin A bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao và điện di mao quản, Luận án tiến sĩ Hóa học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên - ĐHQGHN, Hà Nội..
- Nguyễn Văn Đích Không nên lạm dụng kháng sinh", Báo Y học và đời sống (27), tr.16-20..
- Trần Tứ Hiếu, Từ Vọng Nghi, Nguyễn Văn Ri, Nguyễn Xuân Trung (2003), Hoá học phân tích - Các phương pháp phân tích công cụ, NXB ĐHQG Hà Nội, Hà Nội..
- Phạm Luận (1998), Cơ sở lý thuyết phân tích sắc ký lỏng hiệu năng cao, NXB ĐHQG Hà Nội, Hà Nội..
- Phạm Luận (2004), Cơ sở lý thuyết điện di mao quản hiệu năng cao, NXB ĐHQG Hà Nội, Hà Nội..
- Ngọc Phương Thảm họa lạm dụng kháng sinh cho trẻ", Báo lao động tr.3-5..
- Nguyễn Văn Ri (2007), Các phương pháp tách sắc ký, NXB ĐHQG Hà Nội, Hà Nội..
- Tiêu chuẩn Việt Nam Độ chính xác (độ đúng và độ chụm) của phương pháp đo và kết quả đo, TCVN 6910-2001..
- (1992), “Spectrophotometric determination of cephalexin in dosage forms with imidazole reagent”, Talanta 39(6), pp.703-707..
- Thompson Rapid determination of ampicillin in bovine milk by liquid chromatography with fluorescence detection", Journal of AOAC International 80(1), pp.
- Attila Gaspar, Melinda Andrasi, Szilvia Kardos Application of capillary zone electrophoresis to the analysis and to a stability study of cephalosporins", Journal of Chromatography B 775(2), pp.
- “Trace determination of lactam antibiotics in environmental aqueous samples using off-line and on-line reconcentration in capillary electrophoresis”, Journal of Chromatography A 1185, pp.
- Analysis of different β-lactam antibiotics in pharmaceutical preparations Using micellar electrokinetic capillary chromatography", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 43(2007), pp.
- Cruces-Blanco (2007), “Single-step enantioselective amino acid flux analysis by capillary electrophoresis sing on-line sample preconcentration with chemical derivatization”, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 43, pp.
- "Trace determination of β-lactam antibiotics in environmental aqueous samples using off-line and on-line preconcentration in capillary electrophoresis", Journal of Chromatography A 185(2), pp.
- El-Wasseef Kinetic spectrophotometric determination of ampicillin and amoxicillin in dosage forms", Il Farmaco pp.
- “Evaluation of mixed mode solid phase extraction cartridges for the preconcentration of beta-lactam antibiotics in wastewater using liquid chromatography with UV-DAD detection”, Analytical Chimica Acta 556(2), pp.
- Biyang Deng, Aihong Shia, Linqiu Lia and Yanhui Kang Pharmacokinetics of amoxicillin in human urine using online coupled capillary electrophoresis with electrogenerated chemiluminescence detection", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 48(4), pp.
- Blanchflower WJ, Hewitt SA, Kennedy DG Confirmatory assay for the simultaneous detection of five penicillins in muscle, kidney and milk using liquid chromatography - electrospray mass spectrometry", Analytical Chimica Acta 119(12), pp.
- Bu W, P.Kowalski, I.Ole˛dzka, P.Torres, P.Houston (2003), “Capillary electrophoresis in analysis of veterinary drugs”, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 32(3), pp.
- Carlson Trace determination of β-lactam antibiotics in surface water and urban wastewater using liquid chromatography combined with electrospray tandem mass spectrometry", Journal of Chromatography A pp.
- Christian Horstko¨tter, Dirk Schepmann, Gottfried Blaschke (2003), “Separation and identification of zaleplon metabolites in human urine using capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection and liquid chromatography–mass spectrometry”, Journal of Chromatography A 1014(2), pp.
- pneumoniae from the PROTEKT surveillance study, and comparative in-vitro activity of the ketolide, telithromycin”, Journal of Antimicrobial Chemotherap 50(1), pp.
- Ryu, Doo-Hyun Nam (2000), “Biomolecular engineering: a new frontier in biotechnology”, Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic 10(2), pp.
- Herna´ndez (2000), “Determination of quinolones in plasma samples by capillary electrophoresis using solid-phase extraction”, Journal of Chromatography B 742, pp.
- Díaz-Gar Micelle-mediated spectrofluorimetric determination of ampicillin based on metal ion-catalysed hydrolysis", Analytica Chimica Acta 484(2), pp.
- (1979), “Differential pulse polarographic determination of cephalosporins and their degradation products”, Analytica Chimica Acta 108, pp.
- (1998), “A new derivatization procedure for the determination of cephalexin with 1,2-naphthoquinone 4-sulphonate in pharmaceutical and urine samples using solid-phase extraction cartridges and UV-visible detection”, Analytica Chimica Acta 370, pp.
- (2006), “Voltammetric studies on the antibiotic drug cefoperazone: Quantification and pharmacokinetic studies”, Journal of pharmaceutical and biomedical Analysis 42(4), pp.
- Kay (1997), “Enantiomeric separation of small chiral peptides by capillary electrophoresis”, Journal of Chromatography A 792(1), pp.
- (1983), “Determination of some cephalosporins by differential pulse polarography and linear scan voltammetry”, Analytica Chimica Acta 146, pp.
- Journal of Antimicrobial Chemotherapy 53, pp.
- Katarzyna Michalskaa, Genowefa Pajchela, Stefan Tyski (2008), “Different sample stacking strategies for the determination of ertapenem and its impurities by micellar electrokinetic chromatography in pharmaceutical formulation”, Journal of chromatography A 832(1), pp.
- Kazuo Iwaki, Norio Okumuru and Mitsuru Yamazaki and noriyuki Nimura and Toshio Kinoshita (1990), “Precolumn derivatization technique for high-performance liquid chromatographic determination of penicillins with fluorescence detection”, Journal of Chromatography 504(1), pp.
- Gurule (2001), “Applications of a copper microparticle-modified carbon fiber microdisk array electrode for the simultaneous determination of aminoglycoside antibiotics by capillary electrophoresis”, Journal of Chromatography A 905(1), pp.
- Watanabe (1981), “Fluorimetric determination of secondary amino acids by 7-Chloro-4-nitrobenzyl-2-oxa-1,3-diazole”, Analytica chimica Acta 130, pp.
- and Brier G.(1991), “High-performance liquid chromatographic determination of loracarbef, a potential metabolite, cefaclor and cephalexin in human plasma, serum and urine”, Journal of chromatography B: Biomedical sciences and applications 567(1), pp.129-139..
- (1993), “Studies on electrochemical behaviour of cephalexin”, Analytica chimica acta 282, pp.145-152..
- Masaaki Kai, Hiromi Kinoshita, Mikio Morizono (2003), “Chromatographic determinations of a β-lactam antibiotic, cefaclor by means off luorescence, chemiluminescence and massspectrometry”, Journal of Mass Spectrometry 39(3), pp..
- Mastovska K, Katarzyna Michalska (2004), “Determination of ciprofloxacin and its impurities by capillary zone electrophoresis”, Journal of Chromatography A .
- Michael R Jacobs (2003), “The Alexander Project susceptibility of pathogens isolated from community-acquired respitatory tract infection to commonly used antimicrobial agenta”, Journal of antimicrobial Chemotherap 52, pp.
- (1987), “High performance liquid chromatographic analysis of cephalexin in serum and urine”, Journal of Clinical Pharmacy and Therapeutics 12(6), pp.
- Nozal L, L.Arce1, A.R´ıos2, M.Valcárcel Development of ascreening method for analytical control of antibiotic Residues by micellar electrokinetic capillary chromatography", Journal of Analytica Chimica Acta 523(2), pp.
- (1988), “Polarographic analysis of some cephalosporin antibiotics”, Fresenius Journal of Analytical Chemistry 330(1), pp.
- (1991), “Electrochemical analysis of cephalosporin antibiotics”, Journal of Pharmaceutical &.
- Pawlowski (2000), “Adaptation of capillary electrophoresis to the determination of selected cephalosporins for injection”, Journal of Chromatography A 895(2), pp.
- Pasha C and Narayana B (2008), “A simple method for the spectrophotometric determination of cephalosporins in pharmaceuticals using variamine blue”, Ecletica..
- Química 33(2), pp.41- 46..
- Croubels (2004), “Development of a screening method for analytical control of antibiotic residues by micellar electrokinetic capillary chromatography”, Analytica Chimica Acta 523(2), pp.
- Stadler (2002), “Determination of oxolinic acid in feeds and cultured fish using capillary electrophoresis”, Food Chemistry 78(2), pp.
- Lipman, Itaru Furuta (2001), “Determination of vancomycin in human serum by micellar electrokinetic capillary chromatography with direct sample injection”, Clinica Chimica Acta 312(2), pp.
- Griesea (2002), “Determination of free and liposome-associated daunorubicin and daunorubicinol in plasma by capillary electrophoresis”, Journal of Chromatography A 979(1), pp.
- (1988), “Pulse- polarographic determination of beta-lactam antibiotica and its clinical applications”, Fresenius Z Anal Chem 331, pp.
- Toshimasa Toyoka, Yoshihico Watanabe and Kzuhiro Imai (1983), “Reaction of biological important with 7-Chloro-4-nitrobenzyl-2-oxa-1,3-diazole”, Analytica Chimica Acta 149, pp.
- (1981), “Determination of serum cephalexin by high performance liquid chromatography”, Analytical letters 14(20), pp.
- Zhao, Tianyan You (2004), “Electrochemiluminescence detection with integrated indium tin oxide electrode on electrophoretic microchip for direct bioanalysis of lincomycin in the urine”, Journal of Chromatography B pp.
- Wei Liu, Zhujun Zhang, Zuoqin Liu Determination of betalactam antibiotics in milk using micro-flow chemiluminescence system with on-line solid phase extraction", Analytica Chimica Acta 592(2), pp.
- Hansen (1977), “Simultanoeus Determination of Amoxicillin and Ampicillin in Bocine millk by HPLC with Fluorescence Detection”, Food Chem 45(4), pp.
- Whinney B.C.Mc, Corinne Charlier, J.P.Ungerer (2008), “Simultaneous determination of five β-lactam antibiotics (cefepim, ceftazidim, cefuroxim, meropenem and piperacillin) in human plasma by high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection”, Journal of Chromatography B 864(1), pp.
- (2004), “Polarographic behavior of cephalexin and its determination in pharmaceuticals and human serum”, Journal of pharmaceutical and biomedical analysis 35, pp.1075-1081..
- Dabrah (1997), “Analysis of amino acid enantiomers derived from antitumor antibiotics using chiral capillary electrophoresis”, J