Tìm thấy 20+ kết quả cho từ khóa "đoạn DNA"
tailieu.vn Xem trực tuyến Tải xuống
Tập hợp các vector chứa các đoạn genomic DNA tạo thành thư viện genomic DNA. Mỗi đoạn DNA chứa trong vector của thư viện được gọi là một dòng (clone). Tùy thuộc vào kích thước của các đoạn DNA mà chọn vector là phage (có thể chứa đoạn DNA dài từ 15-23 kb), cosmid (45 kb) hay BAC (>100 kb).. Có thể sử dụng DNA tách từ các mô khác nhau để xây dựng thư viện genomic DNA. Các thư viện genomic DNA của một cơ thể chỉ chứa các đoạn DNA dài ngắn khác nhau nhưng thông tin di truyền không thay đổi.
tailieu.vn Xem trực tuyến Tải xuống
DNA microarray (còn gọi là DNA chip hay gene chip) là một tấm. thủy tinh hoặc nhựa trên đó có gắn các đoạn DNA thành các hàng siêu nhỏ.. Các nhà nghiên cứu sử dụng các con chip như vậy để sàng lọc các mẫu sinh học nhằm kiểm tra sự có mặt hàng loạt trình tự cùng một lúc.. Các đoạn DNA gắn trên chip được. Trên mỗi điểm của chip có hàng ngàn phân tử probe với trình tự giống nhau.. Lịch sử ra đời. Còn quá sớm để nói về lịch sử của DNA microarray vì kỹ thuật này tương đối mới và thuộc về tương.
tailieu.vn Xem trực tuyến Tải xuống
Chúng tôi chưa thu nhận được đoạn DNA tái tổ hợp 600 bp chứa 10 đoạn 60 bp lặp lại mặc dù đă thành công khi thu nhận đoạn DNA 1000 bp chứa 10 đoạn 100 bp lặp lại (Lan et al., 2012). Để khắc phục nhược điểm này, thử nghiệm khuếch đại trình tự 60 bp khác nhau, sử dụng các loại DNA ligase có hiệu suất nối khác nhau (Bauer et al., 2017) là hướng chúng tôi sẽ tiếp tục hoàn thiện..
tailieu.vn Xem trực tuyến Tải xuống
Các vector được dùng để tạo dòng các đoạn DNA in vitro.
tailieu.vn Xem trực tuyến Tải xuống
DNA polymerase δ có thể tổng hợp đoạn Okazaki đầy đủ chỉ từ RNA primer in vitro. đòi hỏi đoạn RNA primer và cả đoạn DNA có khả. năng chứa lỗi do DNA polymerase α tổng hợp phải bị loại bỏ. DNA polymerase δ trước tiên sẽ thế chỗ đoạn RNA primer và đoạn DNA do DNA. polymerase α tổng hợp. 1 được bảo tồn ở Archaea mặc dù thiếu vắng gene tương đồng DNA polymerase α trong hệ gene của archaea. phức tạp), hệ thống nhân. là một phiên bản cỉa tiến của hệ thống của archaea. Ý nghĩa của điều này là gì?
tailieu.vn Xem trực tuyến Tải xuống
DNA sau đó được phân đoạn và chỉ có các đoạn có kích thước nằm trong phạm vi mong muốn được chọn lọc. Các đoạn DNA được đưa vào vector thích hợp. Tập hợp các vector chứa các đoạn genomic DNA tạo thành thư viện genomic DNA. Mỗi đoạn DNA chứa trong vector của thư viện được gọi là một dòng (clone). Tùy thuộc vào kích thước của các đoạn DNA mà chọn vector là phage (có thể chứa đoạn DNA dài từ 15-23 kb), cosmid (45 kb) hay BAC (>100 kb)..
tailieu.vn Xem trực tuyến Tải xuống
PCR đảo ngược (inverse PCR), được dùng để khuếch đại các đoạn phân tử kế cận với đoạn có trình tự DNA đã biết trước, phân tử DNA này được cắt hạn chế và nối lại nhờ enzyme DNA ligase để tạo thành một vòng tròn có tính chất monomer, sau đó đoạn DNA được khuếch đại nhờ hai primer tương đồng với đầu của trình tự đã biết trước (Hình 3.6).. Phân tử DNA có chứa đoạn DNA cần khuếch đại - 2 primer (F và R). Thực hiện phản ứng. Dưới đây là ví dụ minh họa cho một phản ứng khuếch đại:
www.academia.edu Xem trực tuyến Tải xuống
Công nghệ DNA tái tổ hợp 199 Trình tự điều hòa (regulatory sequence). Công nghệ DNA tái tổ hợp 200 Vector tạo dòng (cloning vector). Có thể gắn vào phân tử này một đoạn hoặc một vài đoạn DNA khác nguồn tạo nên phân tử DNA tái tổ hợp dùng để nhân dòng. Công nghệ DNA tái tổ hợp 201 Vùng liên kết ribosome (ribosome binding sites, RBS).
tailieu.vn Xem trực tuyến Tải xuống
Về nguyên tắc, DNA plasmid bị cắt bởi enzyme hạn chế và gắn in vitro với đoạn DNA ngoại lai tạo ra các plasmid tái tổ hợp, sau đó chúng được dùng để biến nạp vào vi khuẩn. Khó khăn lớn nhất là phân biệt giữa các plasmid chứa các đoạn DNA ngoại lai-thể tái tổ hợp (recombinant) và các phân tử DNA vector đã tái tạo lại vòng (recircularization). Sự tái tạo lại vòng của plasmid có thể được hạn chế bằng cách điều chỉnh nồng độ DNA ngoại lai và DNA vector trong phản ứng gắn (ligation).
www.scribd.com Xem trực tuyến Tải xuống
Tuệ Minh (Theo ScienceDaily) Đánh dấu mã vạch DNA trên sinh vật Dự án mã vạch sinh vật sống quốc tế (International Barcode of Life Project - iBOL), là thư viện mã vạch DNA đầu tiên trên thế giới và là dự án lưu trữ hệ gene lớn nhất thế giới đanghoàn thiện. Ở đây, các nhà khoa học sẽ dùng một đoạn DNA để tạo cơ sở dữ liệu cho mọi hình thái sinh vậtsống để có thể xác định được.Để có được mã vạch, các nhà khoa học dùng một đoạn DNA ngắn lấy từ phần mô tiêu chuẩn.
tailieu.vn Xem trực tuyến Tải xuống
Phần amino ở đầu tận cùng của protein ß -galactosidase có thể bổ trợ (bổ trợ α ) gen b -galactosidase sai hỏng (defective) có mặt trong episome F trong tế bào vật chủ. coli và chỉ có thể nhận các đoạn DNA tương đối nhỏ. Các vector vi khuẩn có khả năng lớn nhất cũng chỉ có thể nhận các đoạn DNA trong phạm vi kích thước từ 35-45 kb. Tuy nhiên, các YAC vector có thể tạo dòng các đoạn DNA có kích thước từ 100-2.000 kb.
tailieu.vn Xem trực tuyến Tải xuống
Kết quả các DNA tái tổ hợp được đóng gói in vitro trong các phage λ. Các phage tái tổ hợp mang các đoạn DNA ngoại lai mong muốn được xác định bằng phương pháp lai nucleic acid.. coli) cho nó sinh sản để duy trì và phân tích các đoạn DNA ngoại lai.. Điều quan trọng là chọn vector và DNA ngoại lai như thế nào để kích thước của phage tái tổ hợp nằm trong giới hạn cho phép.. Các bước tạo dòng trong bacteriophage λ . đoạn stuffer được thay bằng đoạn DNA ngoại lai. Phân tử DNA của phage λ .
tailieu.vn Xem trực tuyến Tải xuống
Sự tiện lợi của phương pháp tạo dòng các đoạn DNA lớn trong cosmid đã được Royal và cs. Hình 4.13. Tạo dòng trong cosmid. M13 được xem như là một vật truyền tạo dòng (cloning vehicle), các vector M13 và các DNA primer đặc biệt đã được xây. dựng cho phép tạo dòng đoạn DNA lớn hơn 350 bp từ một dòng đơn. Tạo dòng các đoạn DNA dài được tiến hành bằng cách tạo dòng từng đoạn ngắn chồng lên nhau.. Tạo dòng trong bacteriophage M13.
tailieu.vn Xem trực tuyến Tải xuống
Tuy nhiên, các YAC vector có thể tạo dòng các đoạn DNA có kích thước từ kb. Sau này, người ta cũng đã phát triển các vector vi khuẩn mới có khả năng tạo dòng các đoạn DNA lớn hơn, nhưng cho đến nay vẫn chưa thể đạt được khả năng như các YAC. So sánh một số đặc điểm của các vector tạo dòng. Tạo dòng trong YAC. Vị trí tạo dòng để chèn đoạn DNA ngoại lai là EcoRI.
tailieu.vn Xem trực tuyến Tải xuống
Đoạn cắt hạn chế (restriction fragment). Các đoạn DNA nhỏ được sinh ra sau khi xử lý đoạn DNA lớn bằng enzyme hạn chế.. Đoạn kết thúc phiên mã (terminator hay transcription terminator). Trình tự nucleotide nằm ở cuối gen hoạt động như một tín hiệu kết thúc sự phiên mã. Nó ra hiệu cho RNA polymerase giải phóng phân tử RNA mới được tạo thành ra khỏi gen. Còn gọi là đoạn lớn của DNA polymerase I. Đây là một đoạn của DNA polymerase I (khối lượng phân tử 76.000) của E.
tailieu.vn Xem trực tuyến Tải xuống
Thu hồi DNA từ agarose gel. Nhiều phương pháp đã được xây dựng để thu hồi DNA từ agarose gel, nhưng không có phương pháp nào là hoàn toàn tối ưu. thứ hai hiệu suất chiết DNA từ agarose gel phụ thuộc vào khối lượng phân tử của nó, các đoạn DNA có chiều dài <1 kb có thể được thu hồi hoàn toàn, khi khối lượng phân tử của DNA tăng thì hiệu suất chiết giảm, các đoạn DNA có kích thước >20 kb được thu hồi kém (khoảng hơn 20%.
tailieu.vn Xem trực tuyến Tải xuống
Enzyme DNA polymerase I xúc tác phản ứng thay thế sợi bằng cách xen các dNTP mới vào chuỗi DNA. Nếu một trong các dNTP đã đánh dấu phóng. thì kết quả là phân tử DNA sẽ được đánh dấu với hoạt tính đặc hiệu cao (Hình 5.10).. Đánh dấu bằng kéo dài đoạn mồi. Đoạn DNA cần đánh dấu được biến tính bằng nhiệt, sau đó các đoạn mồi oligonucleotide (thường là các phân tử hexadeoxyribonucleotide) được gắn vào các DNA sợi đơn.
tailieu.vn Xem trực tuyến Tải xuống
Các vector được dùng để tạo dòng các đoạn DNA in vitro.
www.scribd.com Xem trực tuyến Tải xuống
Có thể gắn vào phân tử này một đoạnhoặc một vài đoạn DNA khác nguồn tạo nên phân tử DNA tái tổ hợp dùngđể nhân dòng. Đề cập đến vị trí của một đoạntrình tự nào đó nằm ở phía đầu 3’ của gen hoặc một đoạn gen quan tâm.Công nghệ DNA tái tổ hợp 201 Vùng liên kết ribosome (ribosome binding sites, RBS).
tailieu.vn Xem trực tuyến Tải xuống
Các enzyme này cắt DNA ở các vị trí nhận biết riêng biệt bao gồm từ 4-6 cặp nucleotide có trình tự đối xứng đảo ngược nhau, các đoạn ngắn này gọi là palindrome (đoạn đối xứng: là đoạn DNA có hai sợi hoàn toàn đối xứng giống hệt nhau nếu lật ngược đầu đuôi).. Ví dụ: enzyme EcoRI nhận biết chuỗi hexanucleotide (6 nucleotide):. Giống như EcoRI, nhiều enzyme hạn chế đã tạo ra các đoạn DNA với đầu lồi (protruding) 5’. Một số enzyme hạn chế khác (ví dụ: PstI) tạo ra các đoạn DNA có đầu lồi 5’.